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加减滋水清肝饮抗毛发衰老的实验研究

作者:上海华美整形医院 http://www.textandy.com/ 更新时间:02-16 来源:上海整形美容医院 进入项目答疑区

  [摘要]目的:探讨加减滋水清肝饮抗毛发衰老的作用机理。方法:采用D-半乳糖皮下注射复制衰老动物模型,加减滋水清肝饮高、中、低品量灌胃给药一个月。观察鼠毛的形态并检测毛发微量元素和皮肤SOD活性、MDA含量。结果:高、中品量药物能使衰老鼠毛微量元素含量和皮肤SOD活性明显增加,而皮肤MDA含量降低(P<0.01,P<0.05),而低品量药物无明显统计学意义(P>0.05)。结论:加减滋水清肝饮抗毛发衰老的主要作用机制是增加毛发微量元素含量、升高皮肤SOD活性、降低皮肤MDA含量。

  [关键词]加减滋水清肝饮:毛发:微量元素:SOD;MDA

The hair anti-aging function of increasing and/or decreasing Zi Shui Qing Gan potion

  Abstract:Objective To investigate the hair anti-aging function of increasing and/or decreasing Zishui Qingganpotion.Methods The reconstruction of aging animal models by hypodermic injecting D—galactose.The potionwere to given according to different levels of contents through stomach for a months.The hair morphologywere observed,the hair trace element,the superoxide dismutase(SOD)and the malon dialdehyde(MDA)in skinwere to be examined.Results High and medium contents of Zishui Qinggan potion can increase the contentof hair trace element and the activity of SOD in skin,influence the level of MDA in skin(P<0.01,P<0 05),lowcontents were not statistically significant(P>0.05).Conclusion These results suggest that major hair anti-agingfuntion of increasing and/or decreasing Zishui Qinggan potion works by improving the content of hair trace element,the activity of SOD as well as decrease the contents of MDA.

  Key words:increasing and/or decreasing Zishui Qinggan potion:hair;trace eIement:superoxide dismutase(SOD);malon dialdehyde(MDA)

  谁都知道,在美容学中头发是反映人体外在美的重要标志之一。近年来,随着社会的高速发展,出现了许多不科学的生活方式,再加上精神压力越来越大,许多人出现了失眠、焦虑、烦躁等神经、内分泌火调的现象,较终导致严重的肝肾不足,引起头发的过早衰老。如焦枯分叉易折,曲细无光泽,生长缓慢或脱落等。

  因此,研究毛发衰老的机制及对抗药物具有重要意义。本项目旨在运用现代手术式与手段,将占方滋水清肝饮进行加减,用于D-半乳糖所致衰老人鼠模型,揭示其抗毛发衰老的作用和机制,为该方的临床推广应用提供客观依据。

  1材料和方法  1.1实验动物:健康wistar 白色6 月龄人鼠60 只,体重(200±20)g,雌雄各半,由佳木斯大学实验动物中心提供。各组大鼠在在22~27。C.相对湿度50%~70%的环境中,自由饮水进食,保持自然光照,每周称重一次。

  1.2实验药品及仪器:滋水清肝饮,由熟地黄309、山茱萸159、枸杞子59、当归lOg、牡丹皮lOg、茯苓lOg、柴胡10g、簿荷5g组成,中药材山佳木斯市药材公公提供,按传统方法加水煎成溶液,避光冷藏备用:维生素E使用前以蒸馏水振荡配成0.4%的混悬液:D一半乳糖:超氧化物歧化酶(SOD)、内二醛(MDA)测定试品盒;ICPS-7500型电感耦合高频等离子体发射光谱仪;722N分光光度计:RF-5000型荧光分光光度it‘(日本岛津)DL-6000B型低速冷冻离心机,ALC2104电子分析天平(德国塞多利斯)。

  1.3动物分组、模型建立及给药方法:把60 只大鼠雌雄分开,每组大鼠性别、体重均衡,随机分为6组,每组10 只,分别设为正常组、模型组、阳性对照组、滋水清肝饮高品量组、中品量组和低品量组。正常组每人颈背部皮下注射生理盐水,其他各组参照文献每天颈背部皮下注射D-半乳糖lOOmg /Kg制成哑急性衰老模型。30天后,正常组与模型组每尺灌服生理盐水,阳性组每大灌服维生素E 50mg/Kg,高、中、低品量组分别按成人临床等效鼍及2倍、4倍等效基(即9.5g/hKg、19g/Kg及38g/Kg)灌服滋水清肝饮。各组给药体积均为10ml/Kg,连续30天后处死。

  1.4观察指标  1.4.1观察鼠毛的形态:于实验结束时,用肉眼直接观察各组鼠毛的颜色、_光泽、硬度等。  1.4.2比较各组间鼠毛微量元素含较的不同:用不锈钢剪刀剪取O.3g鼠毛,用中性洗洁刺清洗干净、烘干、剪碎,用电感耦合高频等离子体发射光谱仪进行定较测定各组鼠毛中微量元素Zn、Fe、Ca、Mn、Cu的含量。毛发样品检测委托佳木斯市防疫站完成。

  1.4.3比较各组间大鼠皮肤SOD活性和MDA含较的不同:取皮肤组织适量在冰冷的生理盐水中漂洗,除上血液,滤纸拭干,精密称重,放入平皿内。用移液管量取预冷的生理盐水,生理盐水的总体积是组纵块重量的9倍,用移液管取总量2/3的生理盐水于平皿中,用眼科小剪了尽快剪碎组织块。将剪碎的组织倒入玻璃匀浆管中,再用剩余的1/3生理盐水冲洗残留在平皿中的组纵块,一起倒入匀浆管中进行匀浆,制成10%皮肤组织匀浆。用黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性,采用TAB比色法测定MDA含量。具体操作按试品说明书进行。

  1.4.4统计学方法:计量资料数据用x±s表示,统计分析采用 t检验。

  2结果2.1鼠毛外观特征观察:造模前各组动物毛发亮泽色白,反应良好,饮食正常,行动敏捷:造模一月后除正常组外,其余各组均出现鼠毛枯黄细软,干燥无光泽,双颊脱毛明显,尾部出现色素斑点沉着并逐渐加重,伴有精神萎靡,行动迟缓,皮肤弹性下降,眼球混浊不清,体重减轻等衰老症状:各组动物灌胃给药15人后,鼠毛外观及行为异常逐渐出现不同程度的改善,至30天时鼠毛呈现亮白粗硬,有光泽,伴有动作灵活,眼球清澈透明,精神好,尤以高、中品量组效果明显。

  2.2滋水清肝饮对各组大鼠毛发微量兀素的影响:结果显示,中药高品量组鼠毛中铁含量明显增加,与模型组比较有非常显著性差异(P<0.01),锌、钙、锰、铜含量增加。与模型组比较有显著性差异(P<0.05);中品量组鼠毛中铁、钙含量增加,与模型组比较有显著性差异(P0.05):高品量药物组与维生素E组比较效果有显著差异(P<0.05)。

  2.3滋水清肝饮对大鼠皮肤SOD活性和MDA含量的影响:  结果显示,中药高品量组皮肤SOD活性明显增加,MDA含量明显减少,与模型组比较有非常显著性差异(P<0.01):中品量组与模型组比较有显著性差异(P<0.05):而低品较组与模型组比较无明显差异(P>0.05)。高刺量药物组与维生素E组比较效果有显著差异(P<0.05)。

  3讨论中医认为,“肾其华在发”,“发为血之余”。故毛发的容润与精血旺盛及肾功能状态密切相关。而肝肾同源,若肾精亏虚,日久必损及肝,导致肝血亏虚,肝气郁结,肝阳上亢,气机失调,以致气滞血瘀,不能外荣于发,营养物质无法达到头顶,头卜毛囊得小到滋养,渐渐篓缩,这是导致毛发衰老的重要因素。故宜采用滋阴益肾,清肝活血的方法来延缓毛发的衰老。

  本实验即选用古方滋水清肝饮加减,以滋肾清肝,活血解郁。方中以熟地黄为君药,补血益阴,滋肾养肝:山茱萸、枸杞子为臣药,助君药滋肾养肝,延缓毛发衰老:佐以当归、丹皮、柴胡、茯苓、疏肝健脾,补血活血,从而改善头皮血流,增强局部新陈代谢,使衰老的毛球恢复生机,毛发亮泽变黑或再生:薄荷轻扬升浮引方中诸药达头顶为使药。诸药相合,共奏滋肾清肝,活血解郁之功效。

  研究发现,毛发的颜色、光泽、微量元素的变化,不仪能反映发质的好坏,而且直接反映人体机能、脑和内分泌系统的状态。发中微量元素的测定是研究毛发质地的重要指标之。微量元素较易与毛囊的一SH结合贮留在头发中,而且,头发的代谢速度较慢,微量元素含量相对稳定。因此,测定头发中的微量元素含量还可以反映体内代谢的变化,对疾病的预防、诊断和治效果的判断等均有一定的意义。

  机体的衰老源于细胞的衰老,皮肤老化是机体衰老的外在反映。毛囊是皮肤的附属器官,毛发的衰老必然源于皮肤的衰老。衰老的自由基学说认为,体内自由基产牛过量时会给机体造成多种损害。因自由基非常活泼,具有高度的反应能·可以氧化作用来攻击它们所遇到的任何分子,使细胞中的人分了成分如核酸、蛋白质受到随机的损伤,这种损伤的不断积累,导致细胞衰老死亡。自由基对细胞的主要危害之一是攻击细胞膜,使膜中多元不饱和脂肪酸过氧化,从而损害细胞的结构和功能。超氧化物歧化酶(SOD)对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用,此酶能清除超氧阴离子自由基,保护细胞免受损伤。是机体抗自由基损伤的重要防御机制。因而SOD活力的高低与衰老有着密切的联系,大量研究表明,SOD活性随增龄而下降。而过氧化脂质的分解产物丙二醛(MDA)义是其活泼的交联品,能与蛋白质、核酸等交联,从而使其变性、失活。老年人皮肤变薄起皱,组织弹性降低就是胶原蛋白和弹性蛋白交联变性的结果,这些交联物具仃异常的键,经溶酶体吞噬后不能被消化,蓄积于细胞内成为脂褐素,即老年色素。细胞内脂褐素的人量沉积可引起细胞代谢失常,从而造成细胞的萎缩和死亡。因而SOD与MDA的测定,一方面SOD活力的高低间接反应了机体清除氧自由基的能力,另一方而MDA的高低又间接反应了机体细胞受自由基攻击的严重程度。

  本项目用加减滋水清肝饮作用于衰老人鼠,结果显示:  高、中品量加减滋水清肝饮能使衰老鼠毛的外观得到明显改善,鼠毛微量元素及皮肤SOD活性明显增高.皮肤MDA含量明显降低(P0.05),高品量药物组与维生素E组比较效果有显著差异(P<0.05)。以上结果说明加减滋水清肝饮通过增加毛发微量元素含量及皮肤SOD活性,降低皮肤MDA含量而达到延缓毛发衰老的目的。